Verlag des Forschungszentrums Jülich

JUEL-4261
Schäfer, Susanne
Electrical Characterization of the Cell-sensor Adhesion with Transistor Transfer Function Measurements
172 S., 2008

Ziel dieser Arbeit war die elektrische Charakterisierung der Adhäsion zellulärer Systeme auf nichtmetallisierten, p-dotierten Feldeffekt-Transistoren (open-gate p-FETs) . Dazu wurden frequenzund zeitabhängige Transfer-Funktions Messungen mit verschiedenen Zelltypen sowie mit verschiedenen biomimetischen Systemen durchgeführt . Alle Messungen waren auf der Ebene einzelner Zellen möglich . Feld-Effekt Transistoren des Jülicher Typs wurden für die Charakterisierung der Adhäsion von HEK293 Zellen eingesetzt . Für biomimetische Systeme wie künstliche Membranvesikel oder Erythrocyten-Ghosts wurden planare Feldeffekt-Transistoren entwickelt und prozessiert . Diese waren ebenfalls geeignet, um elektrische Messungen der Zellmigration von Fibroblasten durchzuführen.

Das Design der planaren FETs war an dem FET-Design des Jülicher Typs orientiert, jedoch im Hinblick auf die Leiterbahnkapazität optimiert . Zentrale Aufgabe war die Planarisierung der Chips ohne das aufwändige chemisch-mechanische Polieren . Dies wurde mit einer zusätzlichen Lithographie, einer LOCOS-Oxidation, sowie einem selektiven Ätzschritt erreicht . Das verbleibende LOCOS-Oxid diente als Passivierung der Leiterbahnen . Mit dieser Methode wurden Stufenhöhen von maximal 30 nm erreicht . Dadurch wurde die Topologie der Transistoroberfläche deutlich reduziert und Zelladhäsion und Migration nur noch wenig beeinflusst . Für zukünftige Experimente wurden selbstleitende FETs mit vergrabenem Kanal gebaut . Diese sind besonders als Substrat zur Ankopplung von spannungssensitiven Membranen geeignet . Alle Transistoren wurden im Hinblick auf ihre Threshold-Spannung, sowie ihren Wirkleitwert und ihr Rauschverhalten untersucht und verglichen.

Die statische Adhäsion sowie die zeitabhängige Dynamik unter Einfluss verschiedener Pharmaka wurde an HEK Zellen untersucht . Das Ablösen der Zellen durch die Serinpeptidase Trypsin, sowie der Einfluss des Ionophor Amphotericin B auf die Zellmembran wurden dokumentiert. Vorexperimente für die gleichzeitige impedimetrische und potentiometrische Messung apoptotischer Zellen wurden durchgeführt . Weiterhin wurde die Adhäsion von Membranvesikeln und Erythrocyten-Ghosts erfolgreich gemessen . Bei allen Experimenten konnte der variable Verlauf der Transfer-Funktionen mit einem Modell nachvollzogen werden . Dieses beruht auf einem Ersatzschaltkreis, der sich an dem gängigen Punkt-Kontakt Modell für den Zell-Transistor-Kontakt orientiert . Sowohl die Eigenschaften des Transistors selbst als auch die Morphologie der Zelle bestimmen vier Zeitkonstanten des Systems . Diese wurden qualitativ untersucht.

Die Migration von Fibroblasten wurde zeitabhängig gemessen . Dabei zeigten sich unterschiedliche Charakteristika für Zellvorderseite, Zellmitte und Zellhinterseite . Die Adhäsion wurde auf der Ebene einzelner Filopodien sowie Lamellipodien dokumetiert . Unterschiedliche Zeitkonstanten wurden für das Annähern der Zelle an das Gate, das Stabilisieren des Zellkörpers, sowie das Ablösen der Zellhinterseite abgeschätzt.

Bei allen Experimenten stimmte die optische Kontrolle gut mit der elektrischen Messung überein. Insgesamt erwies sich die Methode der Transfer-Funktions Messungen als außerordentlich geeignet um Zelladhäsion und ihre Dynamik zu charakterisieren.


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Letzte Änderung: 07.06.2022